Начинал с участия в народных сценах. Легкий подвижный темперамент, вкус к комедийной заостренности рисунка определили выбор ролей для Комиссарова преимущественно в комическом репертуаре. Безусловной удачей актера стала роль Керубино в Безумном дне, или Женитьбе Фигаро (1927). На репетициях Станиславский вначале предлагал актеру искать самочувствие ребенка («играйте мою внучку Килялю»), потом изменил задание: играйте мужчину, дрожащего от одного прикосновения к предметам, которых касались женщины. Постепенно ведущей темой образа стала тема зарождающейся любви. Комиссаров был первым исполнителем ролей Натаниэля Винкеля в Пиквикском клубе по Ч.Диккенсу (1934), Дамиса в Тартюфе Мольера (1939), Кэйрлесса в Школе злословия Р.Б.Шеридана (1940), Буланова в Лесе А.Н.Островского (1948), Петрищева в Плодах просвещения Л.Н.Толстого (1951), Бобчинского в Ревизоре Н.В.Гоголя (1967), Голутвина в На всякого мудреца довольно простоты Островского (1973) и др.

Актерскую манеру Комиссарова отличали экономная четкость средств, особое радостное обаяние сценичности, лукавство и заразительная жизнерадостность. Он умел находить свое решение, выступая дублером или заменяя предшественников в ролях: Алешка (На дне М.Горького, 1926), Николка (Дни Турбиных М.Булгакова, 1929), Родэ (Три сестры, 1942) и Епиходов (Вишневый сад А.П.Чехова, 1958), Чичиков (Мертвые души по Гоголю, 1968) и др., умел удерживать зрительский интерес богатой гаммой эмоциональных оттенков, стремительностью переходов от драматизма к комизму.

С 1954 преподавал в Школе-студии МХАТа, был профессором школы. В кино сыграл Скамейкина в фильме Цирк (1936).

Умер Комиссаров в Москве 5 августа 1975.