Испытав влияние Н.Крушевского и Ш.Балли, Матезиус еще до Первой мировой войны высказывал идеи, близкие к структурализму. Впоследствии стал основателем и президентом Пражского лингвистического кружка; совокупность идей, объединявших входивший в этот кружок ученых, во многом была сформулирована именно Матезиусом. Разрабатывал функциональный подход к языку, рассматривающий язык с точки зрения его роли в общении. Основоположник теории актуального членения предложения – исторически первого и поныне наиболее известного подхода к описанию коммуникативной организации высказываний в составе связного текста.